Pendahuluan :
Maldi
MS, diperkenalkan pertama kali pada 1988 oleh hillenkamp dan karas, menjadi
sebuah alat untuk menganalisis peptida , protein , dan biomolekul lain(oligonuklead,karbohidrat
, produk-produk alam dan lipid ). Transfer energi yang efisien dan diarahkan selama desorpsi matriks-dibantu
laser-menghasilkan
ion analit, dan memungkinkan untuk pengukuran senyawa dengan akurasi tinggi dan sensitivitas subpicomole.
Paper ini membahas
konsep dasar MALDI
dan instrumentasi, khususnya pada
utilitas MALDI dalam identifikasi
protein, protein studi
struktural, dan sebagai uji
clicinal.
Mekanisme Maldi-TOF
Maldi menyediakan nondestructive
dan ionisasi penguapan biomolekul besar maupun kecil. (figure.1) pada analisis
maldi-tof , matrix terdiri dari pengkristalan molekul analit. Identitas senyawa
matrix ditentukan sampai batas tertentu dengan trial dan error, tetapi
didasarkan pada beberapa pertimbangan bentuk molekul spesifik:
·
matriks mempunyai berat molekul rendah
tidak menguap selama persiapan sampel.
·
Bersifat asam , bertindak sebagai sumber
proton untuk mendorong ionisasi dari analit.
·
Memiliki penyerapan optik yang kuat ,
baik pada UV atau IR
·
Bersifat polar
Adapun
langkah kerja dari analisis dengam MALDI-TOF MS yaitu :
1.
Melarutkan sampel
2.
Mencampurkan dengan zat khusus(pelarut)
3.
Mengubah cairan(protein) menjadi padatan
dengan meletakan didalam ruang
4.
Mengeluarkan udara dari ruang yang
menyebabkan pelarut menguap
5.
Sinar laser di fokuskan ke permukaan
matriks-analit padat(matriks eksitensi)
6. Matriks
menyerap energi foton dan terionisasi
7. Bahan
yang melewati sepanjang energi UV ke molekul protein menguap ,kemudian
terionisasi
8. Terjadi
tabrakan antara molekul matriks dan mengakibatkan sampel (analit) terionisasi
di udara.
9. Setelah
molekul analit terionisasi , analit di ambil dari ruang penguapan ke MS oleh
tegangan yang diberikan pada ruang.
Beberapa teori telah berkembang
untuk menjelaskan desorption molekul besar oleh maldi. Ejeksi dari molekul
dinisbatkan vibrational penggandengan antara matrix , dan teori mengusulkan
bahwa tekanan gradien diciptakan normal ke permukaan dan desorption molekul
besar mungkin ditingkatkan oleh momentum transfer dari tabrakan ion dengan
bergerak cepat pada matriks . ionisasi terjadi
melalui transfer proton atau
cationzation. Ionisasi sangat bergantung pada kombinasi matriks-analit, tetapi
tidak sangat tergantung pada jumlah gugus asam atau
dasar analit. ini menunjukkan bahwa interaksi yang lebih kompleks antara analit dan matriks, dari kimia asam-basa
yang sederhana,untuk ionisasi.
